哪里做cba检测细胞因子(谈细胞因子的检测-方法BD CBA)
更新时间:2022-07-15 19:35:49细胞因子是细胞经刺激而合成分泌的一类具有广泛生物学活性的小分子蛋白质。细胞因子一般通过结合相应受体调节细胞生长和分化,调控免疫应答,包括促进靶细胞的增殖和分化,增强抗感染和杀伤肿瘤细胞效应,促进或抑制其他细胞因子的合成,促进炎症过程,影响细胞代谢等。因为细胞因子和机体的生命活动息息相关,故科学家们经常检测体内或体外的可溶性细胞因子及受体。检测细胞因子最常用的方法是ELISA方法,这种方法也是非常适合单个因子检测的。但在监测某个疾病进程中,需要在不同的时间点检测小体积样本的多个细胞因子时,流式细胞术的多参数优势就非常适用。尤其在临床科研方面,经常会遇到小体积的珍贵临床样本,如儿科样本。BD的CBA(Cytometric bead array)是用流式方法检测多种可溶性细胞因子,引入了荧光标记的beads作为载体,抗体包被在beads上,检测抗体标记另一个荧光信号。通过双抗体夹心法检测可溶性抗原。最多可同时检测30个细胞因子,需要的样本体积仅25-50ul。多个细胞因子同时检测不仅节省了样本,提高了效率,更重要的提高了实验的精准度。
CBA方法的标准化验证
以Human TH1/TH2 Cytokine kit为例,检测的细胞因子指标:IL-2,IL-4,IL-5,IL-10,TNF,IFN-r。首先,我们进行了此试剂盒中标准品和NIBSC(National Institutes of Biological Standards and Controls)的对比,之所以选用NIBSC的细胞因子标准品,因为NIBSC标准品符合WHO(World Health Organization)的标准且被认可作为国际生物标准品。对比结果如下:
此试剂盒的标准曲线结果请参考:
此外,我们还在同一次实验中用3个不同浓度的标准品去检测10个样本来验证实验的精准性。结果表明,其中6个因子的CV值均小于6%。我们又进行了实验的重复性验证,这次我们通过四次实验用3个不同浓度的标准品去检测两个平行样本,得到的CV值小于或等于10%。
通过系列验证实验结果显示,CBA方法有严格的标准化质量认证和有案可稽的精准性和可重复性,这对于每个科研工作者无疑是最重要的,与科研工作者科学严谨的态度是一致的。
最后和大家分享一个小体积样本的CBA应用,文中分别检测了过敏性和非过敏性患者的5-10ul眼泪样本中细胞因子,结果显示,过敏性患者眼泪中IL-10的浓度显著低于非过敏性患者,对于眼部过敏性疾病的病理生理研究这是一个非常重要的线索。
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